Qual a importância de corantes para a observação de materiais biológicos?

EXAME A FRESCO

Objetivo: Observar microrganismos vivos em material biológico

Princípio: O exame a fresco fundamenta-se na observação de microrganismos vivos (bactérias, protozoários, fungos e leveduras) em suspensão do material biológico entre lâminas e lamínulas, onde se pode observar as formas e os movimentos dos mesmos.

            As bactérias se observa em formas de bacilos, cocos ou espirilos, com ou sem movimento[1]. Os fungos se observa as hifas filamentosas com ou sem septos. As leveduras são esferas maiores com ou sem brotamento. Os protozoários se observa em forma de cistos ou trofozoítos, com ou sem movimento. Dependendo do material, pode-se observar algumas células (células epiteliais, leucócitos, hemácias, etc., ), fibras, cristais, ovos de helmintos, etc.,

Material: Material biológico em suspensão, lâminas, lamínulas, microscópio, pipeta Pasteur (ou conta-gotas)

 Método: Coletar uma gota do material biológico, colocar no centro da lâmina e sobrepor cuidadosamente (sem formar bolhas) uma lamínula. Levar ao microscópio e observar em objetiva de 40 vezes[2]. Após a observação, desprezar a lâmina e lamínula em um frasco contendo detergente.

 Interpretação:Anotar o tipo de microrganismo (bactérias, protozoários, fungos ou leveduras), as formas e a motilidade.

Comentários: O Exame a fresco é um método de observação que preserva a forma natural dos microrganismos e reduzem as distorções que somente ocorrem quando as preparações são secas e fixadas. Em vista da semi-transparência das células, estas preparações não são satisfatoriamente visualizadas a microscópio ótico de campo luminoso. Assim, se examinados pequenos organismos, como bactérias, vivas e suspensas em fluidos, veremos que a observação é precária, e quase impossível discernir claramente sobre qualquer de suas estruturas internas. É como se estivéssemos vendo um fragmento de vidro claro imerso em água cristalina.

            As preparações  a fresco exigem um manuseio completo do microscópio de campo luminoso. Assim é necessário que se façam ajustes na intensidade da luz que ilumina os objetos a serem observados, bem como uma regulagem adequada do condensador. Se possível, é conveniente o emprego de filtros, de modo a melhorar a qualidade da imagem, em fase da iluminação deste sistema ótico. Pode-se lançar mão de outros instrumentos. Uma das alternativas é a microscopia de contraste de fase. A outra forma é o emprego da microscopia de campo escuro.

            Uma preparação a fresco de uma dada espécie bacteriana mostrará, por certo, que ela é incolor, mesmo a despeito de vir produzir um pigmento quando cultivada em caldo ou ágar. Esta circunstância levou a utilização, em microbiologia, de vários corantes que, ao tingir a célula com uma certa coloração, permitiu a visualização de detalhes quanto a arranjo, forma, estruturas, etc.,

Questões:

  1. Porque as dimensões dos vários tipos morfológicos de microrganismos podem ser melhor aferidas através de preparações a fresco?
  2. Para que serve uma preparação em gota pendente? Ela oferece alguma indicação sobre a viabilidade de uma cultura
  3. Citar alguns cuidados, a serem tomados para execução satisfatória do exame a fresco?
  4. Quais as limitações do exame a fresco?
  5. Em que circunstâncias, no diagnóstico laboratorial de doenças infecciosas, o exame a fresco deve ser aplicado?
  6. Qual a principal informação sobre o microrganismo que o exame a fresco pode fornecer?
  7. Os procedimentos realizados estão de acordo com o protocolo. Comente as alterações ou adaptações realizadas
  8. Relacione os matérias listados neste protocolo que não foram utilizados e quais outros materiais utilizados. Será que houve alguma falha no procedimento pela falta ou substituição do material?
  9. Quais as dificuldades encontradas na realização dessa prática?
  10. Os procedimentos de biossegurança foram seguidos com rigor? Quais os possíveis riscos de acidente de trabalho que os alunos e o professor sofreram? Comente sobre as normas de biossegurança.
  11. Elabore 10 questões a respeito da prática ao seu professor, para melhor esclarecimento das suas dúvidas



[1] Não confundir com os movimentos produzidos pela corrente de ar

[2] Não usar óleo de imersão

Origem: Wikipédia, a enciclopédia livre.

Qual a importância de corantes para a observação de materiais biológicos?
 Nota: Se procura pela coloração dos cabelos humanos, veja Tintura de cabelo.

Qual a importância de corantes para a observação de materiais biológicos?

Microscópio ótico e um espécime colorido montado sobre uma lâmina.

Coloração é uma técnica bioquímica de adicionar um corante específico a uma classe (DNA, proteínas, lipídios, carboidratos) a um substrato para qualificar ou quantificar a presença de um composto específico. É similar a técnica de marcação de fluorescência.

Dentre estas soluções de corantes propriamente ditos (pois o iodo, por exemplo, não é um corante neste sentido), são frequentemente usadas em biologia e medicina para a visualização, frequentemente com a ajuda de diferentes microscópios. Tais soluções corantes podem ser usadas para definir e examinar tecidos (salientando, por exemplo, fibras musculares, o tecidos conjuntivos, populações de células (classificando diferentes células sanguíneas, por exemplo), ou organelas dentro de células individuais.

Na medicina, encontra tal técnica grande campo de aplicação no diagnóstico de câncer, infecções e na bacteriologia e micologia, na classificação e identificação de micro-organismos.

A coloração pode se dar em material fixado ou em material vivo, quando então é adequado o uso de corantes vitais (como o vermelho neutro), que devido a baixa toxidade às células, não as mata, suspendendo seus processos, que são o objetivo deste tipo de coloração.

A coloração biológica é também usada para marcar células em citometria de fluxo, e para destacar proteínas ou ácidos nucleicos em eletroforese em gel.

Ver também[editar | editar código-fonte]

  • Coloração diferencial

Ligações externas[editar | editar código-fonte]

  • StainsFile referência para corantes e técnicas de coloração.

Qual a importância da utilização dos corantes para a observação das células *?

A coloração é uma técnica importante em microscopia, pois permite evidenciar estruturas celulares pouco perceptíveis. Isto torna-se viável visto que determinados constituintes celulares tendem a absorver certos corantes enquanto que outros não têm essa capacidade.

Qual a importância da utilização dos corantes?

O corante atua fixando-se eletiva ou seletivamente em determinadas estruturas celulares, conferindo a elas diferentes graus de absorção da luz incidente, e possibilitando a identificação e o estudo de suas alterações por nosso sentido de visão, auxiliado pelo microscópio.

Qual a importância do uso de corantes em uma análise microscópica?

Corantes ajudam na identificação e diferenciação de componentes de células e tecidos. Esses componentes tendem a ser transparentes e os corantes dão aos observadores um meio de ver o que é invisível ao olho humano.

Qual a importância dos processos de coloração na microscopia?

Técnica citológica utilizada em microscopia ótica que utiliza corantes com o objetivo de evidenciar diferentes partes na preparação. A coloração tira partido do facto de os diferentes corantes atuarem de forma desigual sobre as várias zonas celulares.